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化学检验员证书考试条件化验员培训网上报名入口-分光光度计使用全攻略
分光光度计作为实验室中定量分析的核心仪器，其准确性直接影响实验结果的可靠性。
一、分光光度计检验四大核心技巧
（一）波长准确度检验
机械振动、温度波动、灯丝变形等因素常导致波长显示值与实际值偏差。
检验方法：使用干涉滤光片或镨钕滤光片测量吸收峰值，若实测值与标准值偏差超过规程允许范围（如±0.5nm），需通过波长调节装置校正。例如，在可见光区440nm、546nm、635nm波长点，以空气为参比测量中性滤光片透射比，连续3次取平均值验证。
（二）透射比正确度检验
透射比偏差直接影响浓度计算结果。
检验步骤：
1. 选择标准器：采用透射比为10%、20%、30%的光谱中性滤光片（可见光区）或重铬酸钾溶液（紫外光区235nm、257nm、313nm、350nm）。
2. 测量与计算：以空气或高氯酸溶液为参比，连续测量3次透射比，计算实测值与标定值的偏差是否在±0.5%以内。
（三）稳定度检验
稳定度反映仪器长时间运行的可靠性，需从零点稳定性和光电流稳定性两方面验证：
1. 零点稳定性：在无光条件下调节零点，观察3分钟内透射比变化。
2. 光电流稳定性：在测量范围两端向中间靠10nm处，调节透射比至95%（数显仪器为100%），观察3分钟内透射比波动。
（四）杂散光检验
杂散光会干扰低浓度样品测量。检验方法：
· 棱镜式可见分光计在420nm处、光栅式在360nm处、紫外分光计在220nm处，使用截止滤光片以空气为参比测量透射比，结果应低于规程限值。
二、分光光度计标准化操作流程
（一）操作前准备
1. 预热：开机预热20分钟，预热期间打开比色皿暗箱盖切断光路，防止光电管疲劳。
2. 波长选定：根据实验需求旋转波长调节器至目标波长（如核酸定量选260nm，蛋白定量选280nm）。
3. 灵敏度设置：调整灵敏度档使吸光度读数在0.2～0.7范围内，通常固定于“1”档。
（二）测量步骤
1. 调零：打开暗箱盖，调节“0”点电位器使透光度显示为“0”。
2. 调100%透光率：放入空白溶液（如蒸馏水），盖上暗箱盖，调节光量使透光度显示为100%。
3. 样品测定：拉入样品比色皿，读取吸光度值后立即打开暗箱盖。
4. 关机：切断电源，取出比色皿洗净，擦拭座架及暗箱。
（三）关键注意事项
1. 光电管保护：非测量时段必须打开暗箱盖，避免光电管长时间曝光。
2. 比色皿规范使用：
· 手持毛玻璃面，避免污染透光面。
· 清洗时禁用碱液或强氧化剂，有机物污染可用盐酸-乙醇（1:2）浸泡。
· 测定后立即清洗，外壁水渍用擦镜纸吸干。
3. 测量顺序：按浓度由低到高测定，减少误差。
三、分光光度计维护与保养指南
（一）环境要求
1. 安装条件：置于稳定工作台，避开强磁场；温度控制在10～30℃，湿度＜85%，无腐蚀性气体。
2. 电源管理：使用220V±10%稳压电源，波动较大时需配备稳压器。
（二）日常维护
1. 光源保护：不用时关闭光源灯，亮度减弱或不稳定时及时更换，避免用手直接接触灯泡窗口。
2. 单色器保养：密封盒内放置干燥剂，防止色散元件受潮。
3. 光电元件保护：避免强光直射或受潮积尘，长期不用时遮盖防尘罩。
（三）校准周期
建议每年至少进行一次全面校准（波长、吸光度、基线校准），使用频繁或环境恶劣时缩短周期。校准需采用有证标准物质，确保结果溯源性。
总结
分光光度计的精准使用需贯穿“检验-操作-维护”全流程。通过定期检验波长、透射比等核心参数，规范操作流程，并落实环境控制与日常保养，可显著提升仪器使用寿命与测量可靠性。实验人员应结合具体型号（如紫外可见分光光度计、原子吸收分光光度计）的差异化要求，灵活应用上述方法，为科研数据的准确性保驾护航。
