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化验员证怎么考？食品检验员资格证报名+微生物检验员培训-微生物检测的菌落怎么计数？

菌落计数是微生物检测中最关键的环节之一，直接关系到检测结果的准确性。根据GB 4789系列国家标准，不同检测指标的计数规则有所不同，以下系统介绍。

菌落总数计数（GB 4789.2-2022）

有效计数范围

选取菌落数在30~300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板进行计数。低于30 CFU的平板记录具体菌落数，大于300 CFU的记录为"多不可计"。每个稀释度采用两个平板的平均数。

特殊情况处理

• 片状菌落：其中一个平板有较大片状菌落生长时，该平板不宜采用，以无片状菌落的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，且其余一半菌落分布均匀，可计算半个平板后乘以2。

• 链状生长：平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，将每条单链作为一个菌落计数。

• 同一稀释度一个在范围内、一个不在：以在计数范围内的平板菌落数乘以稀释倍数作为报告结果。

结果计算规则

根据不同情况，采用不同的计算方式：

结果报告规则

• 菌落数**<100 CFU**：按"四舍五入"原则修约，以整数报告。

• 菌落数**≥100 CFU**：第3位数字四舍五入后取前2位有效数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式表示（两位有效数字）。

• 称重取样以CFU/g为单位，体积取样以CFU/mL为单位。

计算实例

霉菌和酵母计数（GB 4789.15-2016）

霉菌和酵母的计数规则与菌落总数有明显区别：

有效计数范围

选取菌落数在10~150 CFU之间的平板进行计数（比菌落总数的30~300范围更宽、下限更低）。

计数方法

• 肉眼观察，必要时用放大镜或低倍镜，记录稀释倍数和相应的霉菌、酵母菌落数。

• 根据菌落形态分别计数霉菌和酵母：

• 霉菌：菌落较大，质地疏松，外观干燥不透明，呈蛛网状、绒毛状或棉絮状，正面与反面颜色常不一致。

• 酵母菌：菌落比细菌大、厚且透明度差，通常乳白色，少数橙红色。

• 细菌：菌落较小、较薄、较透明，有"细腻感"（培养基中含氯霉素可抑制大部分细菌生长）。

• 霉菌蔓延生长覆盖整个平板的，记录为"菌落蔓延"。

培养与计数特点

• 培养基：马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）或孟加拉红培养基，均含氯霉素抑制细菌。

• 培养温度：28±1℃。

• 培养时间：5天（120h），正置培养。

• 倾注量较大（20~25mL），防止水分过度蒸发影响霉菌生长率。

结果计算

计算同一稀释度两个平板菌落数的平均值，乘以相应稀释倍数。例如1:10稀释度平均菌数为24，则结果为24×10=240 CFU/g。

计数操作要点

计数工具

• 肉眼观察：大多数情况下可直接肉眼计数。

• 放大镜：用于观察微小菌落，防止遗漏。

• 菌落计数器：带有放大镜和计数笔的专用设备，提高计数效率和准确性。

• 全自动菌落计数仪：通过图像识别自动计数，适用于大批量样品。

计数时机

• 到达规定培养时间后应立即计数。

• 若不能立即计数，将平板置于0~4℃冰箱保存，但不超过24小时。

区分菌落与食品颗粒

食品样品中可能存在与菌落形态相似的微小颗粒，可通过以下方法区分：

• 对照平板法：同时制备一块接种稀释液的平板，不培养直接放4℃冰箱保存，计数时作为对照观察。

• TTC显色法：在培养基中加入0.5% TTC（氯化三苯四氮唑），培养后细菌菌落呈红色，食品颗粒不变色（注意TTC浓度不宜过高，否则会抑制细菌生长）。

平板堆叠要求

• 培养箱中平板倒置放置，堆叠高度不超过6个平板。

• 测试片堆叠不超过20片。

• 目的是确保温度均匀，避免中间平板过热。

常见问题与处理

📌 总结：菌落计数的核心规则是——菌落总数选取30~300 CFU范围的平板，霉菌酵母选取10~150 CFU范围的平板。计数时需特别注意片状菌落、链状生长、食品颗粒干扰等特殊情况的处理。计算结果后按有效数字修约规则报告，空白对照有菌生长则该批次结果无效。实际操作中，严格按照GB 4789系列标准执行是保证结果准确性的根本前提。