灭菌效果验证之生物指示剂

安瓿式生物指示剂：

将生物指示剂垂直放入56℃±1℃ 培养箱内培养，同时取一支未经灭菌的指示剂，同步放入培养箱培养作为阳性对照管，同时培养48h，观察结果。

自含式生物指示剂：

垂直挤压塑料管压破管内的玻璃管（内装紫色液体培养基），使菌片完全浸没在培养基中；

将生物指示剂垂直放入56℃±1℃ 培养箱内培养，同时取一支未经灭菌的指示剂，同上处理，同步放入培养箱培养作为阳性对照管，同时培养48h，观察结果。

A. 培养后当生物指示剂管内培养液由紫色变为黄色，即表示有菌生长，判定灭菌不合格；

B. 培养后当生物指示剂管内仍为紫色表示无菌生长，阳性对照培养液由紫色变为黄色，判定为灭菌合格。

生物指示剂主要性能指标为：菌种及其纯度、总孢子数、D值、存活时间、杀灭时间。

● 总孢子数：生物指示剂芽孢含量应在90%以上，湿热灭菌生物指示剂的芽孢数范围一般在1.0×105〜5.0×106CFU。（依据中国药典2020版四部9208进行检测）

● D值：即微生物的耐热参数，是指一定温度下，将试验微生物杀灭90%所需的灭菌时间或灭菌剂量。

▲一般以时间（分）表示。D值越大，表明该微生物的耐热性越强。

▲灭菌方法验证时，微生物的耐热参数一般使用D121℃。

▲D值需要特定的设备（抗力仪或油浴仪）方可测定。

● 存活时间：将生物指示剂暴露于灭菌条件下一定时间（尽可能长时间）后，使所有生物指示剂培养结果均为阳性。

● 杀灭时间：将所有生物指示剂暴露于灭菌条件下一定时间(尽可能短时间)后,使所有生物指示剂培养结果均为阴性。

F值又称杀菌值，由于微生物的种类和温度均为特指，通常F值要采用上下标标注，以便于区分。一般将标准杀菌条件下的F值记为在121℃热力致死温度下腐败菌的热力致死时间，用F0值表示。