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定期举办微生物检验员培训食品化妆品化验员证书报名-样品菌落计数：倾注法与涂布法的差异及选择建议
在进行样品的菌落计数时，倾注法与涂布法是最常用的两种方法，适用于大多数含菌量一般或较多的样品中菌落计数。对于含菌量很低的样品，可以采用滤膜法或其他方法进行计数。由于这两种方法在操作上存在不同，在计数结果上也可能造成差异。
一、方法操作
（一）倾注法
倾注法的具体操作步骤如下：首先，将灭菌后的培养基冷却至46℃左右。接着，把样品液加入至无菌平皿内，再倒入约15 - 20ml的培养基，轻轻摇晃平皿，使培养基与样品液均匀混合。若样品中可能存在蔓延菌，可在培养基凝固后，上方覆盖约5 - 10mL的培养基，这样可以减少菌落蔓延。待培养基完全凝固后，再进行培养。
（二）涂布法
涂布法的操作步骤为：先将灭菌后的培养基倾入无菌平皿中，待培养基冷却后凝固成平板。然后，在培养基表面涂布样品液，可借助涂布棒涂抹均匀，最后进行培养。
二、差异分析
（一）接种体积
倾注法通常接种体积为1mL/皿，也可以将接种体积控制在0.01 - 1mL之间，但接种体积过小不易混匀。涂布法通常接种体积为0.1mL/皿，也可以接种更小体积，一般不超过0.2mL/皿。部分标准中培养基涂布接种量为0.3 - 0.4mL，此时一般需特殊处理，将平皿预先干燥，否则容易糊成一片。从接种体积方面来看，若样品中含菌量较少，需要接种更大体积的样品液才能得出更为准确的结果，这种情况下倾注法更为适用。若样品中含菌量较多，稀释后再接种，则涂布法和倾注法均可。
（二）温度控制
涂布法不需要控制培养基的温度，制成平板后可以立刻涂布。而倾注法则需要较为准确地控制倾注时培养基的温度。若培养基温度过高，易导致微生物被烫死或数量减少；温度过低则容易产生凝块，影响操作。另外，还有一些嗜冷的微生物对热较为敏感，使用倾注法得出的计数结果会显著低于涂布法。在使用测试片与倾注法对比时，有时也会出现类似的现象，因为测试片法与涂布法类似，不需要控制温度，不会导致微生物被烫死。
（三）菌落特征
涂布法接种的微生物生长在培养基的表面，除了可以计数以外，还可以很方便地观察菌落状态，进行识别和鉴定。而倾注法接种的微生物生长在培养基的内部，不能观察到明显的菌落特征。
（四）蔓延菌
一些菌具有迁移或蔓延生长的特性，在培养基表面生长时会大面积蔓延或连成片，覆盖其他菌落。使用涂布法很难对这类菌进行计数，而使用倾注法则会大幅度减弱这种蔓延的特性，更容易进行计数。
（五）微生物氧气需求类型
样品中可能存在需氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌等不同类型的微生物。涂布法接种的微生物在培养基表面生长，氧气充足，好氧微生物容易快速生长，而厌氧菌则不能生长。倾注法接种的微生物在培养基内部生长，相对氧气较少，好氧菌生长较差，而一些不太严格的厌氧菌甚至有可能生长，这也会造成两种方法菌落计数存在差异。
三、选择建议
（一）根据样品含菌量选择
当样品中含菌量较少时，倾注法更为合适。因为倾注法可以接种较大体积的样品液，能使样品中的微生物更充分地分散在培养基中，从而得出更为准确的结果。若样品中含菌量较多，可先对样品进行稀释，稀释后再接种，此时涂布法和倾注法均可使用。
（二）根据微生物特性选择
如果样品中可能存在蔓延菌，倾注法是更好的选择，它可以有效减弱蔓延菌的蔓延特性，使计数更加准确。对于需要观察菌落特征进行识别和鉴定的情况，涂布法更为适用，因为它能让微生物生长在培养基表面，便于观察。
（三）根据实验条件选择
涂布法不需要严格控制培养基的温度，操作相对简便，对实验条件要求较低。而倾注法需要准确控制培养基的温度，对实验操作的要求较高。如果实验条件有限，无法精确控制培养基温度，涂布法可能是更优的选择。
四、结论
倾注法和涂布法在样品菌落计数中各有优缺点。在实际应用中，应根据样品的含菌量、微生物特性以及实验条件等因素，综合考虑选择合适的方法。只有合理选择计数方法，才能获得准确可靠的菌落计数结果，为微生物检测和研究提供有力支持。
